Expression of the E21b, E21d, and E21e antigenic viral protein variants of bovine viral diarrhea in the CHO cell line /
Simón Tanquero, Jorge Ernesto
Expression of the E21b, E21d, and E21e antigenic viral protein variants of bovine viral diarrhea in the CHO cell line / Jorge Ernesto Simón Tanquero ; tutor Nelson Francisco Santiago Vispo - 42 hojas : ilustraciones (algunas a color) ; 30 cm + 1 CD-ROM
Trabajo de integración curricular
Incluye referencias bibliográficas (páginas 31-35)
Trabajo de integración curricular con acceso abierto
Texto (Hypertexto links)
El virus de la Diarrea Viral Bovina, del género Pestivirus, es un patógeno viral que afecta las vías respiratorias y tasas de fertilidad del ganado a nivel mundial generando substanciales pérdidas económicas para la industria ganadera. Dado el irregular desempeño de las vacunas comerciales disponibles en Chile contra la Diarrea Viral Bovina, y la fuerte inducción de respuesta inmune de la proteína de envoltura E2 de la DVB, nosotros expresamos y caracterizamos tres variantes en un sistema recombinante, de la forma truncada de E2 como base para candidatos de vacuna. Dos vectores de expresión mamífera (pCI-Neo) fueron usados para expresar las variantes de menor tamaño de la glicoproteína principal de envoltura E2, identificadas como E21b, E21d y E21e, en una línea productora estable de células de ovario de hámster chino. Estos genotipos recombinantes expresados compartían características similares electroforéticas y serológicas a las de su contraparte viral. Los vectores plasmídicos contenían una proteína fluorescente (EFGP) y un casete de expresión de resistencia a la neomicina fosfotransferasa, confiriendo resistencia a la Geneticina, para conducir la expresión del cultivo y permitir la selección de células conteniendo el plásmido. Mediante análisis por SDS-PAGE y Western Blot fueron caracterizadas las proteínas blanco expresadas y se seleccionaron las líneas celulares más productoras. Las tres variantes de E2 obtenidas fueron purificadas simultáneamente en un solo paso hasta pureza moderada a través de una cromatografía de Ni-Sepharose, obteniéndose inmunógenos listos para ser utilizadas en pruebas serológicas in vivo.
Textos en inglés con resúmenes en español e inglés
Sistema de expresión mamífero
Sistema de expresión bacterial
Vacuna terapéutica
Biología--Trabajos y disertaciones académicas
Expression of the E21b, E21d, and E21e antigenic viral protein variants of bovine viral diarrhea in the CHO cell line / Jorge Ernesto Simón Tanquero ; tutor Nelson Francisco Santiago Vispo - 42 hojas : ilustraciones (algunas a color) ; 30 cm + 1 CD-ROM
Trabajo de integración curricular
Incluye referencias bibliográficas (páginas 31-35)
Trabajo de integración curricular con acceso abierto
Texto (Hypertexto links)
El virus de la Diarrea Viral Bovina, del género Pestivirus, es un patógeno viral que afecta las vías respiratorias y tasas de fertilidad del ganado a nivel mundial generando substanciales pérdidas económicas para la industria ganadera. Dado el irregular desempeño de las vacunas comerciales disponibles en Chile contra la Diarrea Viral Bovina, y la fuerte inducción de respuesta inmune de la proteína de envoltura E2 de la DVB, nosotros expresamos y caracterizamos tres variantes en un sistema recombinante, de la forma truncada de E2 como base para candidatos de vacuna. Dos vectores de expresión mamífera (pCI-Neo) fueron usados para expresar las variantes de menor tamaño de la glicoproteína principal de envoltura E2, identificadas como E21b, E21d y E21e, en una línea productora estable de células de ovario de hámster chino. Estos genotipos recombinantes expresados compartían características similares electroforéticas y serológicas a las de su contraparte viral. Los vectores plasmídicos contenían una proteína fluorescente (EFGP) y un casete de expresión de resistencia a la neomicina fosfotransferasa, confiriendo resistencia a la Geneticina, para conducir la expresión del cultivo y permitir la selección de células conteniendo el plásmido. Mediante análisis por SDS-PAGE y Western Blot fueron caracterizadas las proteínas blanco expresadas y se seleccionaron las líneas celulares más productoras. Las tres variantes de E2 obtenidas fueron purificadas simultáneamente en un solo paso hasta pureza moderada a través de una cromatografía de Ni-Sepharose, obteniéndose inmunógenos listos para ser utilizadas en pruebas serológicas in vivo.
Textos en inglés con resúmenes en español e inglés
Sistema de expresión mamífero
Sistema de expresión bacterial
Vacuna terapéutica
Biología--Trabajos y disertaciones académicas